JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 5:34 dk. • July 8th, 2025
Başlamak için, üre içeren yükleme boyası ile karıştırılmış floresan etiketli fosforile ve fosforile edilmemiş RNA oligonükleotidleri içeren bir numune alın. Numuneyi ısıtın.
Üre - güçlü bir denatüran - ısı ile kombinasyon halinde ikincil RNA yapısını denatüre eder, bu da doğrusallaştırılmış ve yapılandırılmamış konformasyonu ile sonuçlanır. Şimdi, akrilamid-bisakrilamid çözeltisini üre ile karıştırarak jeli dökün.
Sonraki jel polimerizasyonunu kolaylaştırmak için bir katalizör olan tetrametilen diamin ve oksitleyici bir ajan olan amonyum persülfat ekleyin.
Çözeltiyi önceden monte edilmiş bir kaset aparatına dökün. Numune yüklemesi için kuyucuklar oluşturarak bir tarak yerleştirin. Jelenin polimerize olmasına izin verin. Kaseti jel aparatının içine yerleştirin. Üst ve alt rezervuarlara çalışan bir tampon ekleyin ve tüm jel boyunca akım akışını koruyun. Tarağı çıkarın.
Görselleştirme boyası ile karıştırılmış numuneyi kuyuya yükleyin ve jeli istenen voltajda bir güç kaynağına bağlayın. Jeldeki üre, RNA moleküllerinin doğrusal türler olarak göç etmesine izin verir.
Jel, negatif yüklü RNA moleküllerinin gözeneklerden pozitif elektrota doğru hareket etmesine izin veren bir elek görevi gö
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin