JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 3:41 dk. • July 8th, 2025
Multipleks polimeraz zincir reaksiyonundan kaynaklanan DNA amplikonlarını - belirli uzunlukta amplifiye edilmiş DNA fragmanları - agaroz jel elektroforezi kullanan PCR'yi analiz etmek için, numune yükleme için kuyular oluşturmak üzere taraklı bir döküm tepsisi birleştirin.
Elektroforez tamponunda çözülmüş, bir floresan DNA boyası ile desteklenmiş doğrusal bir polisakkarit olan uygun bir erimiş agaroz konsantrasyonunu döküm tepsisine dökün ve katılaşmasına izin verin.
Erimiş agaroz polimerize olur ve mikroskobik gözeneklere sahip üç boyutlu bir jel oluşturur.
Döküm jeli, tarak tarafı negatif katodun yakınına yönlendirilmiş şekilde bir elektroforez tankına yerleştirin. Tank, optimum iletkenliği korumak için jel hazırlamada kullanılan elektroforez tamponunu içerir. Tarağı çıkarın.
Numune migrasyonunu izlemek için yükleme boya çözeltisi ile karıştırılan PCR ürün numunesini kuyucuklara aktarın. Tanımlanmış uzunlukta DNA merdivenleri ile bir kuyu yükleyin. Elektroforezi başlatın.
Eşit aralıklı negatif fosfat gruplarına sahip DNA amplikonları, kuyucuklardan jele pozitif anoda doğru göç eder ve daha kısa amplikonların daha büyük olanlara göre yüksek hareketliliği nedeniyle uzunluklarına gö
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin