JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 5:05 dk. • July 8th, 2025
Kafes ışık tabakası mikroskobu, LLSM, yüksek uzay-zamansal çözünürlüğe sahip canlı hücrelerde hücre yüzeyi reseptörü-ligand etkileşimlerinin görselleştirilmesini sağlar.
Kırmızı floresan yayan transdüksiyonlu ligand eksprese eden hücreler içeren bir lamel alın. Lamel hücresi yukarı bakacak şekilde yağlanmış bir numune tutucuya takın. Görüntüleme sırasında hassas numune konumlandırma ve taramaya izin vermek için tutucuyu bir mikroskop aşamasının piezosuna sabitleyin. Yazılım ayarlarını, tek bir ligand ifade eden hücreye odaklanacak şekilde ayarlayın.
Reseptör eksprese eden hücre süspansiyonunu lamel üzerine pipetleyin. Reseptörler yeşil florofor işaretli antikorlarla etiketlenir. Etkileşen hücre çiftlerini görüntüleyin.
Mikroskobun uyarma lazeri, bir ışık tabakası oluşturmak için silindirik lenslerden geçen dairesel, doğrusal polarize bir lazer ışını yayar. Işık tabakası, fazla kırınımı ortadan kaldıran ve onu ultra ince bir kafes desenine dönüştüren bir modülatör üzerine yansıtılır.
Kafes ışık tabakası, etkileşen hücre çiftinin ultra ince bir bölümünü aydınlatır ve etkileşen hücreler tarafından yayılan floresan, gelen ışına dik olarak yakalanır. Etkileşen hücre çiftini birden fazla
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin