JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyolojik Teknikler
0 görüntülenme • 4:56 dk. • July 8th, 2025
Nükleozomlar - ökaryotik DNA tekrar eden birimler - histon protein çekirdeklerinin etrafına sarılmış DNA segmentlerinden oluşur. Histon çekirdeğinin etrafındaki DNA'nın açılması, nükleozom dinamikleri için çok önemlidir.
Nükleozom dinamiklerini yakalamak için, bir atomik kuvvet mikroskobu, AFM, tarayıcı aşamasına monte edilmiş pürüzsüz, işlevselleştirilmiş bir mika substratı ile başlayın. Alt tabakayı nükleozom içeren bir tamponla kaplayın.
Negatif yüklü nükleozom DNA'sı, işlevselleştirilmiş mika üzerindeki pozitif yüklerle etkileşime girerek onları yüzeyde hareketsiz hale getirir. Nükleozomların aşırı kalabalıklaşmasını önlemek için hareketsiz hale getirilmiş mika substratını bir tamponla yıkayın.
Nükleozom içeren tarayıcı aşamasını, bir ucu kenarda ve nükleozomlara doğru bakacak şekilde önceden monte edilmiş bir konsol içeren bir görüntüleme odasına aktarın.
Hazneyi bir görüntüleme tamponu ile doldurun. Doğru sapma ölçümleri sağlamak için lazer ışınını konsol arkasına hizalayın.
AFM ucu, tamamen sarılmış nükleozomlara yakın salınır ve düzenli aralıklarla nükleozomların yüksekliğini ölçmek için yüzey üzerinde tarama yapar.
Spontan DNA sargısının açılması, nükleozom yüksekliğini ar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin