Yetişkin Sineklerde Konak-Virüs Etkileşimlerini İncelemek için İntratorasik Viral Nano Enjeksiyon
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:52 dk. • July 8th, 2025
Anestezi uygulanmış vahşi tip ve Dicer-2 mutant erkek Drosophila'yı stereomikroskop altında bir enjeksiyon kabına alın. Sineklerin RNA virüsü replikasyonunu baskılayan herhangi bir simbiyotik bakteri içermediğinden emin olun.
Sinekleri, pozitif anlamlı, tek sarmallı bir RNA virüsü süspansiyonu içeren bir nano enjektör ile göğüs içi olarak aşılayın.
Virüs, reseptör aracılı endositoz yoluyla konakçı hücreye girer ve çift sarmallı ara RNA üreterek çoğalır. Konak örüntü tanıma reseptörü Dicer-2, viral çift sarmallı RNA'yı küçük enterferans yapan RNA'lara, siRNA'lara işler.
siRNA, tamamlayıcı zincirinin çıkarıldığı RNA kaynaklı susturma kompleksi RISC'ye bağlanır. RISC yüklü siRNA'lar, tamamlayıcı baz eşleşmesi yoluyla diğer viral RNA'lara bağlanarak viral RNA bozulmasına ve gen susturulmasına neden olur.
Dicer-2 ve viral RNA etkileşimi, antiviral proteinler üreterek aşağı akış antiviral sinyal kaskadlarını aktive eder. Bu antiviral proteinler, komşu konakçı hücrelerin Janus kinaz veya JAK, proteine bağlı sitokin reseptörleri ile etkileşime girerek reseptör dimerizasyonunu ve JAK fosforilasyonunu başlatır.
Aktive edilmiş JAK'lar, bir sinyal dönüştürücü ve transkripsiyon aktivatörü olan
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin