JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:50 dk. • July 8th, 2025
Dekstran sülfat sodyum veya DSS, bağırsak epitel bariyeri bozulmasının iltihaplanmaya yol açtığı inflamatuar bir bağırsak hastalığı olan koliti indükler.
Doku hasarını değerlendirmek için, DSS'nin neden olduğu kolitin bir murin modelinden izole edilen sabit kolon dokusunu alın. Kolay kesitleme için dokuyu bir gömme ortamına daldırın ve hızla dondurun.
Bir kriyo-mikrotom kullanarak ince bir doku kesiti elde edin ve bunu bir cam slayt üzerinde toplayın.
Slaytı, boyaya pozitif bir yük veren mordana bağlı oksitlenmiş Hematoksilen boyası içeren bir çözeltiye - bir metal katyonu - batırın. Boya-mordan kompleksi, negatif yüklü DNA'ya bağlanarak çekirdeği kırmızımsı-mor renkte boyar.
Dokuyu farklılaştırıcı bir asit-alkol çözeltisine batırın, spesifik olarak bağlı olmayan boyayı sitoplazmadan ve hücre dışı matristen çıkarın. Dokuyu bir mavileştirme ajanı - alkali bir ortam - ile durulayın ve çekirdeğe mavi bir renk vererek kontrastı artırın.
Dokuyu kurutmak için slaydı artan alkol konsantrasyonlarına daldırın ve karşı leke penetrasyonunu artırın.
Dokuyu karşı lekeye batırın - asidik eozin çözeltisi - bazik sitoplazmik proteinlere ve hücre dışı matrise pembe renk verir. Fazla eozini çıkarmak
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin