Konak-mikrobiyota etkileşimlerini incelemek için bir ex vivo bağırsak organ kültürü sistemi

Konakçı ve bağırsak mikrobiyotası arasındaki etkileşimleri ex vivo incelemek için, belirli bağırsak kolonize edici bakterilerden arınmış bir murin kolon dokusu ile başlayın. Dışkıyı çıkarmak için dokuyu bir ortamla yıkayın ve uygun bir ortam içeren çok kuyulu bir plakaya aktarın.

Aynı zamanda, çok kuyulu, ex vivo bağırsak organ kültürü cihazını monte edin.

Cihazın her bir oyuğu iki eşleştirilmiş giriş ve çıkış portu içerir - ilki kolon lümenine bağlanır ve ikincisi doku canlılığını korumak için kuyucuklara sürekli bir ortam beslemesi sağlar.

Dokuyu cihaza aktarın. Kolonun proksimal ve distal uçlarını ilk giriş ve çıkış portu çiftine bağlayın. Luminal uyarıcı akışını kolon lümenine ve orta akışı kuyuya başlatın.

Uyarıcı, mukus tabakasını parçalayan enzimler salgılayan ve bunların alttaki epitel hücrelerine bağlanmasına izin veren bağırsak kolonize edici bakteriler içerir. Bu, yerleşik dendritik hücrelerin dendritlerini epitel hücreleri arasında uzatmalarını, bakteriyel antijenleri yakalamalarını ve spesifik bağışıklık tepkileri oluşturmalarını tetikleyen bir sinyal kaskadını aktive eder.

Sonuç olarak, naif CD4 + T hücreleri Th17 hücrelerine farklılaşır.

Th17 hücreleri, istilacı pato