JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:33 dk. • July 8th, 2025
Canlı bakterileri ölçmek için koloni oluşturan birime veya CFU tahliline başlamak için, büyüme ortamında kültürlenmiş makrofajlar içeren çok kuyulu bir plaka alın. Makrofajları, hücre içi büyüme yeteneğine sahip patojenik bir bakteri olan Listeria monocytogenes ile enfekte edin.
Enfeksiyon sırasında, makrofajlar bakterileri yutar ve bakterileri zara bağlı bir bölme - bir fagozom içinde içselleştirir.
Bakteriler gözenek oluşturan bir toksin salgılar ve fagozomal zarı bozar. Böylece bakterilerin sitozole girmesine ve makrofajlar içinde çoğalmasına izin verilir.
Enfekte makrofajları, hücre içi bakterileri korurken içselleştirilmemiş bakterileri seçici olarak ortadan kaldıran bir antibiyotik olan gentamisin ile kısaca tedavi edin.
Antibiyotik içeren üstteki ortamı aspire edin. Daha sonra, enfekte makrofajların üzerine steril damıtılmış su ekleyin ve hipotonik bir ortam yaratın. Bu, su moleküllerinin hücrelere girdiği ve makrofaj lizizine neden olduğu ve bakteriler de dahil olmak üzere hücre içi bileşenleri serbest bıraktığı ozmoza yol açar.
Hücre içi bakteri içeren hücre lizatını lizojeni agar plakasına yayın, tek tek bakteri hücrelerinin ayrılmasını teşvik edin ve bağımsız büyümelerin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin