JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:23 dk. • July 8th, 2025
Drosophila C virüsü veya DCV, pozitif tek sarmallı bir RNA virüsü, yaygın olarak Drosophila melanogaster'i enfekte eder.
Enfeksiyon sırasında DCV, viral genomu çoğaltmak için konak hücre makinesini kullanır ve sonunda virüs parçacıkları üretir. Enfekte hücreler sitopatik etkiler, CPE sergiler ve bölünememeleri nedeniyle lizise uğrar veya lizis olmadan ölürler.
Ortalama virüs doku kültürü enfektif dozunu belirlemek için, enfekte hücrelerin yarısının CPE gösterdiği DCV konsantrasyonu, seri olarak seyreltilmiş DCV süspansiyonları ile başlar.
Doğal bir DCV konakçısı olan Drosophila melanogaster'in geç evre embriyolarından türetilen yarı yapışık Drosophila S2* hücrelerini içeren çok kuyulu bir plakaya aktarın. Ortam ve hücreler içeren kuyular negatif kontrol görevi görür.
Virüsün hücreleri enfekte etmesi için kuluçkaya yatırın. Virüsle enfekte olmuş hücreler, hücre hasarı ve ölümü yoluyla CPE gösterir. Kuluçka sonrası, mikroskop altında kuyuları gözlemleyin.
Seyreltmeler arasında CPE pozitif ve negatif kuyuları tanımlayın. DCV'nin ortalama virüs doku kültürü enfektif dozunu belirlemek için uygun bir yöntem kullanın.
Ortalama virüs doku kültürü enfektif dozunu belirlemek için, önce 1 x 1
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin