JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:00 dk. • July 8th, 2025
Seçilen kuyucuklarda mezenkimal kök hücreler veya MSC'ler içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Makrofajları tanıtın ve inkübe edin, ko-kültür kuyularında MSC-makrofaj etkileşimini kolaylaştırın.
Tüm kuyucuklara pH'a duyarlı bir florofora konjuge edilmiş bir maya hücre duvarı bileşeni olan zymosan ekleyin.
Makrofaj süpürücü reseptörleri zimozana bağlanır ve bir fagolizom oluşturmak için bir lizozom ile birleşen bir fagozom içinde yutulmasını tetikler.
Fagolizozom içindeki asidik bir pH, floroforun floresan yaymasına neden olur.
Ko-kültür kuyularında, MSC'ler, makrofajlarla köprü kuran sitoplazmik uzantılar olan tünelleme nanotüpleri veya TNT'yi yansıtır. MSC mitokondrileri, makrofajlara girmek için TNT'den geçer ve toplam fonksiyonel mitokondri sayısını arttırır.
Yüksek bir mitokondriyal sayı, fagositozda bir artış için enerji gereksinimini besleyen adenozin trifosfat veya ATP üretimini artırır.
İçselleştirilmiş florofor konjuge zimozanlardan zaman içindeki floresan yoğunluğunu kaydedin.
Ko-kültür, sadece makrofajlara sahip kuyucuklara kıyasla artmış floresan gösterir, bu da makrofaj fagositozunun MSC aracılı artışını gösterir.
Ortamı, mezenkimal kök hücreler içeren deneysel kuyucuklar
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin