Ex Vivo Koşullarda HIV Patogenezini İncelemek için Bir İnsan Servikal Mukoza Enfeksiyonu Modeli

Servikal uterus mukozasını bir petri kabına yerleştirin. Ektoserviks ve endoserviks mukozasını submukozadan ayırın. Mukozal tabakayı daha küçük eksplantlar halinde dilimleyin ve bunları konik bir tüpe aktarın.

İnsan immün yetmezlik virüsü tip 1 veya HIV-1'i eksplant tüpüne ekleyin. HIV-1 virüsü partikülleri açıkta kalan mukozal tabakaya yaklaşır ve konak hücre üzerindeki CD4 reseptörüne ve CXCR4 ko-reseptörüne bağlanır.

Bağlandıktan sonra, viral zarf konak hücre zarı ile birleşir ve viral RNA ve ters transkriptaz enzimi içeren bir viral kapsidi sitoplazmaya bırakır. Sitoplazmanın içinde, ters transkriptaz viral RNA'yı tamamlayıcı DNA'ya veya cDNA'ya dönüştürür.

cDNA, integrazın viral DNA'yı konakçı genomuna dahil ettiği konakçı hücre çekirdeğine hareket eder. Viral DNA, yeni virüs parçacıklarına dönüşen yeni viral RNA ve proteinlerin sentezini yönlendirir. Bu parçacıklar konakçı hücreden tomurcuklanır ve bir lipit zarfı alır.

Bağlanmamış virüsleri temizlemek için eksplantları uygun bir tamponla durulayın. Son olarak, eksplantları uygun bir ortama sahip çok kuyulu bir plakaya jelatin bir sünger üzerine yerleştirin ve inkübe edin.

Hava-sıvı arayüzü, sünger kılcal damarlar aracılığıyl