JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 2:32 dk. • July 8th, 2025
Anestezi uygulanmış bir erkek fareyi alın ve cinsel organına bir kateter yerleştirin.
Üretraya üropatojenik bakteriler sokun. İdrar yolunun içinde, bakteri üroepitel hücresine bağlanır.
Bakteriyel yüzey proteinlerinin konak hücre zarı proteinleri ile etkileşimi, hücre iskeletinin yeniden düzenlenmesine neden olur ve konak hücre zarının bir fermuar mekanizması aracılığıyla bakterinin etrafına sıkıca sarılmasına neden olur.
Bakteri daha sonra zara bağlı bir vezikül içinde içselleştirilir. Vezikül içinde bakteri, veziküler membranda bir gözenek kompleksi oluşturmak üzere bir araya gelen α-hemolizin toksin monomerleri üretir.
Bakteri, gözenek kompleksinden konakçı hücre sitoplazmasına kaçar ve burada hücre içi bakteri toplulukları veya IBC'ler oluşturmak üzere çoğalır. IBC'ler, hücre dışı boşlukta bulunan bağışıklık hücrelerinin doğrudan saldırısından korunan, konakçı hücreler içindeki yoğun, biyofilm benzeri yapılardır.
Üropatojenik bakteriler IBC'ler içinde olgunlaştıkça, sonunda komşu hücreleri enfekte etmek için konakçı hücrelerden çıkarlar ve idrar yolu enfeksiyonlarına neden olurlar.
Erkek fareleri aşılamak için, farenin dış genital organına kraniyal ve kaudal olarak iki başparmak forseps yerleştirin. Glans penisini tamamen ortaya çıkarmak için prepusu geri çekin. Ardından, penis dışarıdan konumlandırıldıktan sonra, başparmak forsepslerini serbest bırakın. Organı nazikçe ama gergin bir şekilde tutarak hayvana dik olarak çıkıntılı penisi stabilize etmek için forsepsleri yeniden konumlandırın. Daha sonra, üretral meatusun ucundaki küçük açıklıktan kateteri dikkatlice yerleştirin ve gerginliği nazikçe korumak için forseps kullanarak nazikçe penise yönlendirin.
Kateterin göbeği penisin ucuyla buluştuğunda, çok yavaşça, penisin pozisyonunu korurken 50 mikrolitre aşı yapın. Damlatma kalitesini, burada gösterildiği gibi önceden belirlenmiş bir damlatma kalite puanına göre not edin. İnokulumun sızmasını önlemek için kateteri 5 saniye boyunca yavaşça geri çekin. Fareyi sırtüstü pozisyonda kafesine yerleştirin. Hayvan, anestezik uygulandıktan 30 ila 45 dakika sonra iyileşmeye başlamalıdır.