JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:56 dk. • July 8th, 2025
Bir transmembran reseptörü olan sodyum taurokolat ko-taşıyıcı polipeptit veya NTCP'yi eksprese etmek için genetik olarak modifiye edilmiş bir insan karaciğer kanseri hücre kültürünü alın.
Rekombinant hepatit B virüsü veya HBV ekleyin. Virüs, yüzey proteinlerini içeren bir dış zarf ve genomu çevreleyen bir iç nükleokapsid içerir. Bir lusiferaz raportör geninin eklenmesi, virüsün üreme yeteneğini engeller.
Viral zarf proteini, konak hücrenin NTCP reseptörüne bağlanır.
NTCP, epidermal büyüme faktörü reseptörü, EGFR ile etkileşime girer ve oligomerize ederek virüsün EGFR aracılı endositozunu indükler.
Viral zarf, nükleer gözenek kompleksinde parçalanan nükleokapsidi serbest bırakmak için endozom zarı ile birleşir.
Viral genom çekirdeğe girer ve lusiferaz da dahil olmak üzere viral proteinleri kodlayan kovalent olarak kapalı dairesel DNA'ya veya cccDNA'ya (kararlı bir şablon) dönüşür.
Önceden tanımlanmış aralıklarla, hücreleri hasat edin ve hücre içi lusiferazı serbest bırakmak için parçalayın.
Bir muhabir alt tabakasını tanıtın. Lusiferaz, substratı oksitleyerek bir sinyal üretir.
Lusiferaz aktivitesinde enfeksiyon sonrası bir artış, viral genomun sürekli ekspresyonunu gösterir.
HBV en
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin