Lenf sıvısını toplamak için bir sıçan modelinde mezenterik lenf kanalı kanülasyonu

Karnı açıkta kalacak şekilde cerrahi olarak müdahale edilmiş bir sıçan ile başlayın.

Sağ böbreğe dik uzanan ve mezenterik arterin önünde ve paralelinde bulunan superior mezenterik lenf kanalını bulun.

Peri-renal yağ yatağından düz forseps geçirin.

Peri-renal yağ yatağından bir lenf kanülü çekin, bir ucunu lenf kanalına bitişik olarak konumlandırın ve diğer ucunun hayvanın vücudunun dışına çıkmasına izin verin.

Ardından, lenf kanalında küçük bir kesi oluşturun.

Kanülü antikoagülan bir solüsyonla doldurun ve lenf kanalına yerleştirin.

Kanalın içinde lenf sıvısı, pıhtı oluşumuna yol açan bir dizi olayı tetikleyen pıhtılaşma faktörleri de dahil olmak üzere çeşitli biyomoleküller içerir.

Bununla birlikte, antikoagülan pıhtılaşma faktörlerine bağlanarak aktivitelerini inhibe eder.

Bu, pıhtılaşmamış lenf sıvısının kanülden serbestçe akmasını sağlar.

Kanülü yerine sabitlemek için giriş deliğinin üzerine bir veteriner yapıştırıcısı sürün.

Ameliyattan bir gün önce, kanülleri uygun uzunluklarda kesin ve her bir boru parçasının ucunda bir eğim oluşturmak için steril bir cerrahi bıçak kullanın. Daha sonra, intraduodenal kanülü hazırlamak için, kanülü tekrar kendi üzerine geçirin ve ardından tüpte bir bağlantı noktası oluşturmak için kanülü ısıtın.

Ameliyat günü, anestezi uygulanmış yetişkin bir sıçanın karnının ve boynunun sağ tarafından ve sol köprücük kemiği bölgelerinden kürkü tıraş edin ve ardından cerrahi bölgeleri art arda üç povidon-iyot solüsyonu ve% 70 etanol ovma ile aseptik olarak temizleyin.

Mezenterik lenf kanalını kanüle etmek için, hayvanı sağ tarafı yukarı bakacak şekilde yerleştirin ve karın kası duvarının üst tabakasını, ksifoid süreçten sağ kanada uzanan dört santimetrelik düz bir kesi ile açmak için steril bir neşter bıçağı kullanın, kostal kenarın yaklaşık iki santimetre altında.

İnce bağırsağı sol karın duvarının altına geri çekin ve yerinde tutmak için normal salinle doyurulmuş iki ila üç parça steril gazlı bez kullanın. Daha sonra, mezenterik lenf kanalının görüntülenmesine yardımcı olmak için fareyi, hayvanın sırtının altına yatay olarak yerleştirilmiş 10 mililitrelik plastik bir şırınga üzerinde sağ böbrek seviyesinde köprüleyin.

Çapı yaklaşık 0,5 ila 1 milimetre olan, sağ böbreğe dik olan ve hemen rostral ve koyu kırmızı titreşimli mezenterik artere paralel olan superior mezenterik lenf kanalını bulun. Aç olmayan sıçanlarda, burada gösterildiği gibi, üstün mezenterik lenf kanalının beyaz, opak ve açlık sıçanlara göre görselleştirilmesi daha kolay olduğunu unutmayın.

Daha sonra, üst mezenterik lenf kanalına paralel olarak sağ böbreğin alt kenarındaki peri-renal yağ yatağından ve vena kava'nın hemen altındaki bağ dokusu katmanlarından bir çift düz forseps geçirin. Daha sonra, forsepsin ucunu kullanarak, lenf kanülünü, bir ucu mezenterik lenf kanalının hemen bitişiğinde, diğer ucu ise sağ böbrek seviyesinde hayvandan dışlanmış olacak şekilde peri-renal yağ yatağından çekin.

Daha sonra, cerrahi bir mikroskop ve kuyumcu forsepsleri kullanarak, mezenterik lenf kanalını, alt uçtan başlayarak ve lenf kanalına zarar vermemeye dikkat ederek, künt diseksiyon ile üstteki bağ ve yağ dokusu katmanlarından izole edin. Kanal izole edildiğinde, lenf kanalında küçük bir delik açmak için ince uçlu forsepsin ucunu kullanın. Lenf kanülünün tamamen antikoagülan solüsyonla doldurulduğundan ve hava boşluğu olmadığından emin olduktan sonra, lenf kanülünü delinme yoluyla mezenterik lenf kanalının yaklaşık iki ila dört milimetre içine yerleştirmek için küçük bir forseps kullanın.

Kanülasyon başarılı olursa, kanülün serbest toplama ucundan kademeli bir bağırsak lenf akışı gözlenecektir. Bu meydana geldiğinde, kanülü sabitlemek için lenf kanalına giriş deliğinin üzerine küçük bir damla siyanoakrilat yapıştırıcı damlatın ve damarı fazla yapıştırıcı ile tıkamamaya dikkat edin.