Kültürlenmiş Makrofajlarda Leishmania Virülansının Değerlendirilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:46 dk. • July 8th, 2025
Lameller üzerinde kemik iliği türevi makrofajlar içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın.
Makrofajları, parazitin bulaşıcı aşaması olan Leishmania promastigotları ile tedavi edin.
Kuluçka sırasında, parazitler makrofajlarla etkileşime girerek F-aktinin etkileşim bölgesi etrafında toplanmasını kolaylaştırır.
Makrofajlar, F-aktin ile çevrili fagozomlardaki parazitleri yutar ve parazitoforlu vakuoller veya PV'ler oluşturur - replikatif bir niş.
PV'ler içinde parazitler hayatta kalma faktörlerini serbest bırakır, vakuollerin etrafındaki F-aktin birikimini arttırır ve lizozomlarla füzyonlarını inhibe eder.
Ek olarak, parazitler, bir makrofaj peptit hormonu olan hepsidin üretimini düzenler, demir salınımını engeller ve hücre içi demir seviyelerini yükseltir.
Vakuollere demir akışı, patojenik amastigotlara promastigot farklılaşmasını teşvik eder ve çoğalmalarını kolaylaştırarak virülansı arttırır.
İnkübasyon sonrası, serbest parazitleri uzaklaştırmak için yıkayın, ardından enfekte makrofajları sabitleyin ve geçirgen hale getirin.
Enfekte makrofajların ve amastigotların çekirdeklerini boyamak için bir nükleik asit floresan boyası ekleyin.
Bir floresan mikroskobu altında, makrofajın büyük
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin