JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:28 dk. • July 8th, 2025
Endotel hücrelerinin bir kültürü ile başlayın.
Ortamı anaerobik ortamla değiştirin. Sıcaklık dengelemesi için anaerobik bir odada inkübe edin.
Patojenik anaerobik bir bakteri olan Porphyromonas gingivalis'i ekleyin ve kısa bir süre inkübe edin.
Bakteriler, endotel hücreleri üzerindeki spesifik yapışma moleküllerine bağlanan ve bakteri yapışmasını kolaylaştıran fimbriae olarak bilinen proteinli çıkıntılara sahiptir.
Bu bağlanma, hücre içi sinyal kaskadlarını tetikleyerek aktin hücre iskeletinin yeniden düzenlenmesine ve fagozomlara bakteri içselleşmesine neden olur.
İnkübasyon sonrası, ortamı çıkarın. Yapışmamış hücre dışı bakterileri uzaklaştırmak için anaerobik bir tamponla yıkayın.
Konak hücre zarlarına nüfuz etmek ve hücre lizizini indüklemek için hafif bir deterjan ekleyin, içselleştirilmiş ve yüzeye bağlı bakterileri hasara neden olmadan serbest bırakın.
Lizat içeren bakterileri ortamla seyreltin ve seri seyreltmeler hazırlayın.
Bu seyreltmeleri kanlı agar plakaları üzerine koyun. Porphyromonas gingivalis'in çoğalmasına ve koloniler oluşturmasına izin vermek için anaerobik koşullar altında inkübe edin.
Kuluçka sonrası, yüzeye bağlı ve içselleştirilmiş bakterileri ölçmek için h
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin