JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:27 dk. • July 8th, 2025
Floresan etiketli sitoplazmik proteinlere sahip bir kanser hücresi kültürü alın.
Anti-tümör aktivitesine sahip sitokin kaynaklı öldürücü veya CIK hücreleri - doğal öldürücü hücre benzeri özelliklere sahip efektör T hücreleri - ekleyin.
CIK hücreleri üzerindeki doğal öldürücü grup 2 üyesi D veya NKG2D reseptörleri, kanser hücreleri üzerindeki strese bağlı proteinlere bağlanır.
Bağlanma, CIK hücrelerinin sitoplazmik granül toksinlerini - perforinler ve granzimleri serbest bırakmasına neden olur.
Perforinler, kanser hücre zarında gözenekler oluşturur ve kaspazları aktive eden ve apoptozu indükleyen granzimlerin girişine izin verir.
Kuluçka sonrası hücreleri hasat edin. Floresan nükleik asit bağlayıcı hücre canlılık boyası ekleyin.
Boya, hasarlı hücre zarından girer ve DNA'ya bağlanır, bu da çift lekeli ölü hücrelere neden olur.
Sağlam bir hücre zarı ile canlı hücreler boyaya karşı geçirimsizdir.
Tek floresan gösteren canlı hücreleri ve çift floresan ile ölü hücreleri tespit etmek için hücreleri bir akış sitometresinden geçirin.
CIK hücrelerinin sitotoksik etkisini ölçerek ölü kanser hücrelerinin yüzdesini ölçmek için bir dağılım grafiği oluşturun.
Sitotoksik tahlili gerçekleştirmek iç
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin