JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:12 dk. • July 8th, 2025
Isıyla öldürülmüş Mycobacterium tuberculosis veya Mtb ile önceden aşılanmış anestezi uygulanmış bir fareyi ele alalım, bu da bir bağışıklık tepkisini indükler ve Mtb'ye özgü T hücreleri oluşturur.
Daha iyi göz görüntüleme için ışık penetrasyonunu artırmak üzere göz bebeği genişlemesi için göz damlası uygulayın. Kornea dehidrasyonunu önlemek için bir jel uygulayın.
Vücut ısısını korumak için fareyi gazlı bezle sarın ve optik koherens tomografi veya OCT sistemine yerleştirin.
Kornea ve lens dahil olmak üzere ön kamaranın ve retina da dahil olmak üzere arka kamaranın kesitsel görüntülerini elde etmek için gözleri görüntüleyin.
Enflamasyon olmadığından emin olmak için inceleyin.
Isıyla öldürülmüş Mtb'yi vitreus boşluğuna enjekte edin. İmmünojen göz boyunca yayılır ve önceden oluşturulmuş Mtb'ye özgü T hücrelerinin ve diğer bağışıklık hücrelerinin infiltrasyonunu indükleyerek üveit adı verilen iltihaplanmaya neden olan bir bağışıklık tepkisini tetikler.
Ön kamaranın OCT'si infiltre olmuş bağışıklık hücrelerini ve kornea ödemini ortaya çıkarırken, arka kamaranın OCT'si vitreus iltihabını gösterir.
Üveit ilerlemesini ölçmek için OCT görüntülerini inflamasyon şiddetine göre puanlayın.
Fareyi uyuşturduktan sonra, fazla damlacıkların burun veya ağza girmesini önleyerek öğrenciyi bir damla% 2.5 fenilefrin ile genişletin. İki ila üç dakika sonra, fazla sıvıyı kurutun ve% 0.3 hipromelloz jeli ile gözü kapatın. Ardından, vücut ısısını korumak için fareyi bir cerrahi gazlı bez tabakasına sarın, ardından fareyi hayvan kasetinin üzerine yerleştirin ve kafayı ısırma çubuğu ile konumlandırın.
Optik koherens tomografi veya OCT görüntülerini elde etmek için OCT görüntüleme sistemini açın ve görüntüleme yazılımını açın. Arka kamara görüntülemesi için, lensin yüzeyini gözle temas ettirmemeye dikkat ederek OCT'yi göz yüzeyine yaklaştırın.
Göz doğru şekilde yerleştirildikten sonra, Hızlı Taramayı durdurun, Hacim Tarama protokolünü seçin ve Amaç seçeneğiyle taramayı etkinleştirin. Arka segment görüntüleri için, optik sinir yatay B-Scan hizalama görüntüsünde ortalanana ve retina dikey hizalama ekseni ile hizalanana kadar ayarlayın. Ön segment görüntüleri için, konumu hem yatay B-Scan hizalama görüntüsünde hem de dikey B-Scan hizalama görüntüsünde korneanın tepesini ortalayacak şekilde ayarlayın. Son olarak, toplu tarama görüntüsünü yakalamak için Anlık Görüntü'ye tıklayın. Ardından Kaydet'e tıklayın.