JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:40 dk. • July 8th, 2025
Sitokinler gibi uyarıcı faktörler olmadan büyüme ortamındaki lösemi hücrelerini alın ve inkübe edin.
Uyarıcı faktörlerin yokluğu, hücre içi fosforile proteinlerin defosforilasyona uğramasına ve doğal durumlarına geri dönmesine izin verir.
Ortamı santrifüjleyin ve çıkarın. Sitokin, timik stromal lenfopoietin veya TSLP içeren stroma-süpernatandaki hücreleri yeniden süspanse edin.
TSLP, lösemi hücresi üzerindeki reseptörüne bağlanarak reseptör dimerizasyonunu tetikler.
Bu, Janus ile ilişkili iki kinazı veya JAK'ları daha da yakınlaştırır ve karşılıklı transfosforilasyonu kolaylaştırır.
Aktive edilmiş JAK'lar, reseptörün sitoplazmik kuyruklarını fosforile ederek, sinyal dönüştürücü ve transkripsiyon aktivatörü, STAT monomerleri için kenetlenme bölgeleri oluşturur.
Fosforile edildikten sonra, STAT'lar aşağı akış hücresel süreçlerini düzenlemek için reseptörden dimerize olur ve ayrılır.
Hücre içi proteinlerin fosforilasyon durumlarını korumak için hücreleri sabitleyin.
Hücre zarı geçirgenliğini artırmak için hücrelere bir geçirgenlik çözeltisi uygulayın.
Fosforile proteinleri etiketlemek için floresan etiketli antikorlar ekleyin.
Floresan sinyalinin akış-sitometrik ölçümü, TSLP'nin neden
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin