Lenfosit Alt Tiplerini Karakterize Etmek için Üç Boyutlu Kantitatif Faz Görüntüleme

Bir lenfosit alt tipi süspansiyonu bir görüntüleme odasına yükleyin.

Odayı 3D kantitatif faz görüntüleme mikroskobu aşamasına yerleştirin.

Optimum görüntüleme için mikroskop parametrelerini ve odak düzlemini ayarlayın.

Lenfosit görüntüleme sırasında, lazer ışını referans ve örnek ışınlarına ayrılır.

Numune ışınının yolunda bir mikro ayna dizisine sahip olan Dijital Mikro Ayna Cihazı, ışının optik eksen etrafında 360 derece dönmesini sağlar.

Lenfositten geçen her ışın, hücre içindeki kırılma indisi değişimlerine bağlı olarak bir faz kaymasına uğrar.

Elde edilen numune ve referans ışınları yeniden birleşerek bir 2D hologram oluşturur.

Farklı açılardan faz ve genlik bilgilerini içeren bir hologram dizisi, lenfosit etrafındaki ışın dönüşü yoluyla yakalanır.

Lenfositler hariç, farklı aydınlatma açılarına sahip birden çok arka plan hologramı edinin.

Kırınım tomografisi algoritmasını kullanarak, hologramları bir 3D kırılma indisi tomogramına yeniden oluşturun ve etiketlemeye gerek kalmadan lenfositlerin morfolojik ve biyokimyasal bilgilerini sağlayın.

Optimum görüntüleme için, her hücre örneğini mikrolitre RPMI ortamı başına 180 hücre konsantrasyonuna seyreltin ve ilk seyreltilmiş numunen