JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 7:53 dk. • July 8th, 2025
Fosfolipidler ve biyotinile fosfolipidlerden oluşan, desteklenen bir lipid çift tabakası veya SLB ile bir oda slaytı hazırlayın.
Spesifik olmayan etkileşimleri önlemek için bloke edici proteinler ekleyin.
Biyotinile fosfolipidlere bağlanan streptavidin'i tanıtın.
İmmobilize streptavidin'e bağlanan biyotinile floresan etiketli anti-CD16 antikorları ekleyin.
Streptavidin'in hücrelere spesifik olmayan bağlanmasını önlemek için D-biotin pipetleyin.
Doğal öldürücü veya NK hücrelerini tanıtın. Bu hücrelerdeki CD16 reseptörleri, spesifik olarak SLB'ye bağlı anti-CD16 antikorlarına bağlanarak immünolojik bir sinaps oluşturur.
Bu bağlanma, aktinin yeniden düzenlenmesini ve mikrotübül polarizasyonunu tetikler ve sonunda sinaps merkezinde SLB'ye bağlı anti-CD16 antikorları ve CD16 reseptörleri içeren mikrokümeler oluşturur.
Perforin içeren litik granüller polarize olur ve sinapstaki aktin filamentlerinden nüfuz eder.
Hücreleri düzeltin. Membranları ve SLB'yi geçirgenleştirin.
Sırasıyla aktin filamentlerine ve perforine bağlanan floresan etiketli phalloidin ve anti-perforin antikorlarını ekleyin.
Süper çözünürlüklü bir floresan mikroskobu kullanarak, sinapstaki floresan aktin filamentlerinin v
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin