Akış Sitometrik Analizi için Doğal Öldürücü Hücre Aracılı Sitotoksisite Testi Numune Hazırlama

0 görüntüleme2:40 dk • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Doğal öldürücü veya NK hücreleri ve floresan lekeli hedef hücreler içeren bir hücre peleti ile başlayın.

Peleti uygun bir ortamda tekrar süspanse edin ve inkübe edin.

NK hücresi, yüzey yapışma proteinleri aracılığıyla etkileşime girerek hedef hücre ile immünolojik bir sinaps oluşturur.

Bu, sinaps içine perforin ve granzimler içeren sitotoksik granülleri serbest bırakarak NK hücresi sinyallemesini başlatır.

Gözenek oluşturan bir protein olan perforin, hedef hücrenin zarında kanallar oluşturarak granzimlerin sitoplazmaya girmesine izin verir.

Bir serin proteaz olan granzim, hücre içi proteinlerle etkileşime girerek hedef hücredeki apoptotik yolu aktive eder.

Şimdi, propidyum iyodür floresan boya ekleyin.

Boya, ölü hücrelere hasarlı zarlarından girer ve baz çiftleri arasında ara araya girerek DNA'ya bağlanır.

Sonuç olarak, ölü hücreler çift florokrom eksprese ederken, canlı hücreler tek florokrom eksprese eder.

Numune, ölü ve canlı hedef hücre sayılarını ölçerek NK hücresinin neden olduğu sitotoksisiteyi değerlendirmek için akış sitometrisi için hazırdır.

Bir sitotoksisite tahlil numunesi hazırlamak için, önce her numune ve / veya katılımcı için uygun şekilde 1,5 mililitrelik tüpleri etiketleyin ve istenen oranda NK hücreleri ve DiO etiketli K562 hücrelerini her tüpe pipetleyin.

Hücreleri santrifüjleme ile toplayın ve hücre peletini bozmadan süpernatanı dikkatlice çıkarın. Daha sonra, hücre karışımını 500 mikrolitre eksik NK hücre ortamında yeniden süspanse edin ve her tüpteki hücreleri 5 mikrolitre propidyum iyodür ile etiketleyin.

Hücreleri başka bir santrifüjleme yoluyla toplayın ve soğuk kültürü iki saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. İnkübasyonun sonunda, hücreleri aynı santrifüj koşulları altında santrifüjleyin ve peleti 25 mikrolitre taze ve eksiksiz NK hücre kültürü ortamında yeniden süspanse edin.

08:31

Görüntüleme Sitometrisi ile İnsan Monosit türetilmiş dendritik hücrelerle Karakterizasyonu: İki Monosit İzolasyon Protokoller Arasında Bir Karşılaştırma

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:17

Akış NK Hücre Fonksiyonları İzleme Testi Sitometri tabanlı

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:42

Dextran fare ve insan birincil NK hücreleri Lentiviral iletim verimliliğini artırır

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:35

Akış Sitometrisi ile İnsan Sitokin ile İndüklenen Öldürücü Hücrelerin CD İşaretleyici Tanıması

İlgili videolar

0 Görüntüler

05:27

Sitokin ile İndüklenen Öldürücü Hücrelerin Sitotoksik Yeteneğini İncelemek İçin Bir İn Vitro Test

İlgili videolar

0 Görüntüler

04:57

Periferik Kan Mononükleer Hücrelerinde İmmün Hücre Alt Kümelerini Tanımlamak için Bir Akış Sitometrisi Testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:28

T Hücreleri İçin Kantitatif Yüksek throughput Tek hücreli Sitotoksisite Testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

10:14

Sitotoksik Aktiviteyi Ölçmek için Hücre Bazlı Akış Sitometrisi Testi

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:14

İnsan Tüm Kan Natural Killer Hücre Parçalayıcı Faaliyet Akışı Sitometrik Analizi

İlgili videolar

0 Görüntüler

06:08

Akış Sitometresi tabanlı sitotoksisite tahlil insan NK hücre etkinliği değerlendirilmesi için

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 22 Ağustos 2026