JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:10 dk. • July 8th, 2025
Doğal akciğer mikro mimarisini koruyan, insan hassasiyetiyle kesilmiş akciğer dilimleri içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Medyayı çıkarın. Kuyucuklara artan test ajanı konsantrasyonları ekleyin ve inkübe edin.
Sitotoksik potansiyeline bağlı olarak, test ajanı hücre zarlarını bozarak hücre ölümünü indükler ve dilimler içindeki canlı hücreleri azaltır.
İnkübasyon sonrası, ortamı çıkarın. Dilimleri suda çözünür tetrazolyum tuzu veya WST-1 ve bir elektron birleştirme reaktifi içeren ortama daldırın.
Kuluçkaya yatmak. Metabolik olarak aktif hücrelerde, plazma zarı elektron taşıma sistemi, elektronları hücre içi NADH'den hücre dışı elektron birleştirme reaktifine aktararak, hücre geçirimsiz boya WST-1'i kararlı, koyu sarı, suda çözünür formazana indirger.
Kuluçka sonrası, formazanı eşit şekilde dağıtmak için plakayı sallayın ve çok kuyulu bir plakaya aktarın.
Bir mikroplaka okuyucu kullanarak, doku canlılığının göstergesi olan formazanın emilimini ölçün.
Test ajanı konsantrasyonuna bağlı olarak formazan absorbansındaki bir azalma, test ajanının sitotoksisitesini doğrulayarak akciğer dilimi canlılığının azaldığını gösterir.
Çalışma çözeltisinin bir ana karışımını hazırlamak için, her kuyu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin