İmmünomodülatör Bileşiklerin Taranması için Tasarlanmış Lenfositlerin Kullanıldığı Floresan Bazlı Bir Test

Transgenik fare türevi T lenfositlerinin bir süspansiyonunu içeren floresan uyumlu çok kuyulu bir plaka ile başlayın.

Bu lenfositler, T hücresi reseptörü veya immünomodülatör bileşiklerle TCR etkileşimi tarafından kontrol edilen yeşil bir floresan proteini veya GFP ekspresyon kaseti içerir.

Her kuyucuğu farklı potansiyellere sahip immünomodülatör bileşikler içeren bir çözelti ile tedavi edin.

İnkübasyon sırasında, immünomodülatör bileşikler T lenfositleri üzerindeki TCR'ler ile etkileşime girer.

Uyarıcı bir bileşik ile TCR etkileşimi, gen kasetinin aktivasyonunu tetikleyerek GFP ekspresyonunu yükseltir.

Buna karşılık, inhibitör bir bileşik ile TCR etkileşimi, gen kasetini inhibe eder ve GFP ekspresyonunu azaltır.

Ardından, çekirdekleri boyamak için hücreleri nükleik asit floresan boyası ile kaplayın.

Doğru floresan ölçümü için hücreleri yerleştirmek için plakayı santrifüjleyin.

Bir floresan mikroskobu altında, canlı T lenfositleri, hücre çekirdeğine ve yeşil floresan proteinlere karşılık gelen iki floresan sinyali sergiler.

Yoğunlaştırılmış yeşil floresan, T lenfositlerinin başarılı bir şekilde uyarıldığını gösterirken, soluk bir hücre içi yeşil floresan sinyali, immünomodülatör bi