JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:54 dk. • July 8th, 2025
Kırmızı kan hücresi tükenmiş splenositleri, hücre başına kalsiyuma duyarlı bir floresan boya, Indo-1 içeren bir tamponda alın.
Hücre içi esterazlar, Indo-1'yi kalsiyum iyonlarına bağlanan ve Indo-1'in floresan sinyalini maviden mora değiştiren zar geçirimsiz Indo-1'e ayırır.
Hücreler üzerindeki ilgili antijenlere spesifik olarak bağlanan florofor konjuge antijene özgü antikorları tanıtın.
Akış sitometrisini kullanarak, florofor etiketli B hücrelerini tanımlayın ve Hint-1 mor-mavi floresan oranlarını ölçün.
Şimdi, hücreleri, lipozom çift katmanlarına konjuge edilmiş IgM Fab fragmanlarını içeren antijenik lipozomlarla tedavi edin.
B hücresi reseptörleri, lipozoma bağlı antijenlere bağlanarak ilişkili sitoplazmik tirozin kinazları aktive eder ve fosfolipaz-C gama-2 aktivasyonunu tetikler.
Aktive edilmiş fosfolipaz-C, membran fosfolipidi, fosfatidilinositol 4,5-bifosfatı parçalayarak inositol 1,4,5-trisfosfat veya IP3 dahil olmak üzere ikinci haberciler oluşturur.
IP3, endoplazmik retikulum üzerindeki IP3 kapılı kalsiyum kanallarına bağlanarak kalsiyum iyonlarını sitoplazmaya bırakır.
Bu kalsiyum iyonları, bağlanmamış Hint-1 moleküllerini bağlayarak mor floresansı arttırır.
Etiketli B
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin