JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 2:49 dk. • July 8th, 2025
Uygun gözenek boyutuna sahip dikey rejenere selüloz membranlar içeren büyük hacimli bir santrifüj filtre cihazı alın.
Tampon ve santrifüj ekleyin. Akış içeren membran nemlendiricisini çıkarın.
Cihazı, çözünür proteinleri ve hücre dışı vezikülleri veya bakteriler tarafından salgılanan biyomolekülleri içeren nano boyutlu lipide bağlı yapıları kapsayan bakteri kültürü süzüntü proteini veya CFP ile yükleyin.
Santrifüjleme sırasında CFP, merkezkaç kuvveti ile membranlardan teğetsel olarak geçer.
Zarın gözeneklerinden daha küçük biyomoleküller kültür sıvısı ile geçerken, EV'ler gibi daha büyük moleküller zar yüzeyinden geçerek zar tıkanmasını en aza indirir.
Filtre, biyomolekül kurumasını önlemek için ölü durdurma hacminin yardımıyla CFP'yi minimum cihaz hacmine konsantre eder.
Tampon ve santrifüj ekleyin.
Tampon, artık ortam bileşenlerinin yerini alarak CFP biyomolekülleri için izotonik bir ortam yaratır ve bütünlüklerini korur.
Konsantre kabını filtre kabının üzerine yerleştirin, ters çevirin ve santrifüjleyin. Daha fazla analiz için konsantre CFP retentatını geri kazanın.
Başlamak için, PBS'nin tam hacim kapasitesini ekleyerek 100 kilodalton moleküler ağırlık kesme santrifüj filtresi
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin