JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:38 dk. • July 8th, 2025
Polisakkarit reçine parçacıklarının inert bir matrisi ile paketlenmiş bir boyut dışlama kromatografi sütunu alın. Gözenekli parçacıkların tanımlanmış bir gözenek boyutu vardır.
Optimum saflaştırma için kolonu bir dengeleme tamponu ile yıkayın.
Patojenik bir bakteri olan Mycobacterium tuberculosis kültüründen işlenmiş konsantre bir kültür süzüntüsü ekleyin. Süzüntü, hücre dışı veziküller veya EV'ler ve bakteriler tarafından salgılanan diğer çözünür proteinleri içerir.
EV'ler heterojen boyutlu, küçük, küresel yapılardır. Bir lipit çift tabakası içine alınmış makromoleküller ve virülans faktörleri içerirler.
Numune matrise yerçekimi altında girer. Numunenin sütun boyunca hareket etmesine izin vermek için tamponu ekleyin.
EV'ler, küçük gözenek boyutu nedeniyle reçineye giremez ve bunun yerine parçacıklar arası boşlukta hareket eder, daha kısa bir yol kat eder ve önce dışarı çıkar.
Daha küçük bir boyuta sahip olan proteinler gözeneklere girer, reçine boyunca daha uzun bir yol kat eder ve sonunda elüte olur.
Aşağı akış analizi için EV'leri içeren fraksiyonları toplayın.
Boyut dışlama kromatografisinin veya SEC kolonunun oda sıcaklığına dengelenmesine izin verin. Kule ünitesinin arkasında
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin