JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:54 dk. • July 8th, 2025
Biyotin açısından zengin bir yüzey oluşturmak için bir kapak camını biyotinile poli-L-lizin ile kaplayarak başlayın.
Daha sonra, biotin'e bağlanan ve sonraki etkileşimler için moleküler bir köprü oluşturan bir protein olan streptavidini tanıtın.
Daha sonra, yapışma molekülleri ile birlikte ana histouyumluluk komplekslerine - pMHC'lere bağlı biyotinile fotokafesli peptitler ekleyin.
Biyotinile pMHC ligandları ve adezyon molekülleri, streptavidin üzerindeki belirli bölgelerle etkileşime girerek immobilizasyonlarını sağlar.
Ardından, kapak camını tamponlanmış tuzlu su ile tekrar tekrar yıkayın ve T hücrelerini ekleyin.
Peptit üzerindeki belirli bir kalıntıya bağlı ışığa duyarlı bir kimyasal grup olan bir fotokafesin varlığı, T hücresi reseptörünün peptitle spontan bağlanmasını engeller.
Kontrollü T hücresi aktivasyonu için, fotokafesli peptitleri ultraviyole ışığa maruz bırakın.
UV ışığı, fotokafes-peptit kompleksi arasındaki kimyasal bağı kopararak peptitin doğal formunu açığa çıkarır.
T hücresi reseptörleri, maruz kalan peptitleri tanımlar ve bunlara bağlanırken, integrinler yapışma moleküllerine bağlanarak T hücresi aktivasyonunu tetikler.
Damıtılmış deiyonize su içinde 1 ila 500 o
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin