JoVE Encyclopedia of Experiments
İmmünoloji
0 görüntüleme • 2:59 dk • July 8th, 2025
Zayıflatılmış tüberküloza neden olan bir bakteri olan Mycobacterium bovis BCG'yi alın ve intradermal olarak bir fareye enjekte edin.
Bakterilere karşı inflamatuar bir yanıt, bakteriler, epiteloid makrofajlar, konvansiyonel makrofajlar ve lenfositleri içeren bir granülom oluşturur.
Manyetik rezonans görüntüleme veya MRI gerçekleştirin. Manyetik alan, dokudaki rastgele yönlendirilmiş protonları kendi yönünde hizalar.
Manyetik alana dik bir radyo frekansı darbesi uygulayın. Protonlar nabızdan gelen enerjiyi emer ve alandan uzağa doğru eğilir.
Darbe durduğunda, protonlar serbest indüksiyon bozunması veya FID olarak adlandırılan emilen enerjiyi yayar ve alanla yeniden hizalanır.
Bir görüntü elde etmek için FID sinyalini ölçün. Çürüme süresi dokuya özgüdür ve çürüğün daha uzun olduğu bölgeler daha hafif görünür.
Mycobacterium'a özgü poliklonal antikorlara konjuge süperparamanyetik nanoprobları alın ve intravenöz olarak enjekte edin.
Antikorlar, bakteri üzerindeki birden fazla epitopa bağlanır ve granülomu etiketler.
Nanoproblar, granülomun daha koyu görünmesini sağlamak için komşu protonların bozunmasını kısaltır ve mikobakteriyel enfeksiyonu doğrular.
Deney hayvanlarını M. bovis BCG ile aşılamak için, önce Liyofilize aşıyı veya bakteri stoğunu Sotron'un besiyerinde sulandırın ve sulandırılmış stok çözeltisini tuzlu su ile seyreltin. Daha sonra, 100 mikrolitre çözeltiyi hayvan başına 1 mililitrelik bir şırıngaya yükleyin ve tüm bakteri hacmini, intradersal olarak, her farenin sol veya sağ dorsal skapular derisine enjekte edin.
Canlı nanoprob enjekte edilen hayvanların in vivo manyetik rezonans görüntülemesi için, her farenin kuyruk damarına 200 mikrolitre salin içinde süspanse edilmiş iki nanomolar SPIO-Tb antikor probu enjekte etmeden önce, anestezi uygulanmış her bir deney hayvanının temel T2 ağırlıklı hızlı dönüşlü yankı görüntülerini elde edin. Ardından, enjeksiyondan hemen sonra ve sonraki 30 dakika boyunca her beş dakikada bir hayvanları tekrar görüntüleyin.
Görüntüleme seansının sonunda, bir M. tuberculosis granülom merkezinin karşılaştırılabilir konumlarında tanımlanmış ilgi bölgelerinin ve bir granülomatöz alana bitişik sırt kasının ölçümü olarak sinyal yoğunluğunu kullanarak manyetik rezonans görüntülerini kantitatif olarak analiz edin. Ardından, kontrast maddelerinin enjeksiyonundan önce ve enjeksiyondan sıfır ila üç saat sonra sinyal yoğunluğu ölçümünü kullanarak bağıl sinyal geliştirmelerini hesaplamak için formülü kullanın.
Bu çalışma, farelerde granülom oluşumunu indüklemek için Mycobacterium bovis BCG kullanımını ve inflamatuar yanıtı görselleştirmek için manyetik rezonans görüntülemenin (MRI) uygulanmasını incelemektedir. Araştırma, görüntüleme kontrastını artırmak amacıyla süperparamanyetik nanoproblar ile granülom arasındaki etkileşime odaklanmaktadır.
Bu teknik, hedeflenmiş nanoprob ile geliştirilmiş MRI aracılığıyla akciğer dışı tüberkülozun non-invaziv tespitini sağlayarak, anti-tüberküloz terapötiklerin değerlendirilmesi için preklinik bir model sunmaktadır. Granülom oluşumunu ve yanıtını in vivo olarak görselleştirerek, konakçı odaklı tedavilerin mekanistik risklerinin azaltılmasını desteklemekte ve tüberküloz ilaç keşif programlarında hedef doğrulama için öngörü güvenini artırmaktadır.
Bu yöntem, hedef doğrulamadan öncü bileşik optimizasyonuna ve preklinik etkinlik testlerine kadar uzanan keşif sürekliliğine uygun olup, her aşamada karar verme sürecini destekleyen görüntüleme tabanlı biyobelirteçler sağlar.
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
İlgili videolar
0 Görüntüler
Son güncelleme: 22 Ağustos 2026