JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:46 dk. • July 8th, 2025
Yıkanmış bir tahlil plakasına insan gözyaşı örnekleri ve bir antikor boncuk kokteyli ekleyin.
Antikorlar, çoklu sitokin tespitini kolaylaştıran, farklı spektral imzalara karşılık gelen değişen oranlarda florofor ile emprenye edilmiş renk kodlu manyetik boncuklara bağlanır.
Gözyaşı sitokinleri, karşılık gelen boncuk bağlı yakalama antikorlarına bağlanır.
Manyetik bir plaka yıkayıcı kullanarak, antikor-boncuk komplekslerini çökeltin. Tampon kullanarak, bağlanmamış biyomolekülleri çıkarın.
Bağlı sitokinlere bağlanan biyotinile tespit antikorları ekleyin.
Biyotinile antikorlara bağlanan pipet streptavidin-fikoeritrin konjugatı.
Plaka yıkayıcıyı kullanarak, bağlanmamış kuyu içeriğini çıkarın. Kılıf sıvısında sitokine bağlı kompleksleri yeniden süspanse edin.
Numune analizi sırasında, akışkan sistem boncuk komplekslerini optik düzeneğe taşır.
İlk lazer, iç boncuk boyalarını aktive eder ve elde edilen sinyal spesifik sitokinleri tanımlar.
İkinci lazer, sinyal yoğunluğu sitokin konsantrasyonunu temsil eden boncuk kompleksine bağlı raportör molekülü aktive eder ve çoklu sitokinlerin aynı anda miktar tayinini sağlar.
Boncuk bazlı multipleks testini gerçekleştirmek için, tüm reaktifleri oda s
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin