JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:33 dk. • July 8th, 2025
Bir mikronötralizasyon testi için, influenzaya özgü nötralize edici antikorların azalan konsantrasyonları ile ısıyla inaktive edilmiş, seri olarak seyreltilmiş insan serumu içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Patojenik influenza virüslerini tanıtın. Serum antikorları virüslerle etkileşime girer ve onları nötralize eder; Bununla birlikte, daha yüksek serum dilüsyonları sınırlı virüs nötralizasyonu sergiler.
Madine-Darby Köpek Böbrek hücreleri veya MDCK hücreleri ile tohum, yüzeylerinde insan sialik asit kalıntılarını aşırı eksprese eder.
Daha yüksek seyreltmede, nötralize edilmemiş influenza virüsleri, hücrelerin sialik asidi ile birleşir ve viral genomu hücre sitoplazmasına bırakır.
Viral genler kopyalanır ve konakçı hücre içindeki viral proteinlere ve nükleoproteinlere çevrilir.
Fiksasyon ve geçirgenlik için yüksek konsantrasyonda aseton ile muamele edin.
Viral nükleoproteinlerle etkileşime giren primer antikorları tanıtın.
Birincil antikorlarla etkileşime giren enzim konjuge ikincil antikorlarla kaplama. Enzimin substratı ile yıkayın ve işlemden geçirin, renkli bir ürün elde edin.
Renk yoğunluklarını ölçün ve bunları serum seyreltmesine karşı çizin; Yüzde elli virüs nötralizasyonu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin