Tek Bir Hücreden Protein Salgılarını Tespit Etmek için Lokalize Yüzey Plazmon Rezonans Görüntüleme

Karboksil grupları içeren kendi kendine monte edilmiş tek katmanlı işlevselleştirilmiş altın nanoyapılı diziler içeren bir cam sensör çipi ile başlayın.

Çipi bir mikroakışkan düzeneği içine sabitleyin ve karboksil gruplarını aktive etmek için bir bağlayıcı yerleştirin.

Bağlayıcılar aracılığıyla aktive edilmiş karboksil grupları ile konjuge olan peptit ligandları ekleyin.

Deaktivatör bileşik içeren bir tampon ile muamele edin, spesifik olmayan bağlanma bölgelerini devre dışı bırakın ve bir tamponla yıkayın.

Polarize bir ışığı çipin üzerine odaklayın. Lokalize bir yüzey plazmon rezonans görüntüleme sistemi kullanarak, karanlık bir arka plana karşı parlak kareler olarak görünen dizilerin bir görüntüsünü elde edin.

Rezonans açısında altın elektronlar ışığı emer. Sensör yanıtını oluşturmak için yansıyan ışık yoğunluğunu ilgili açıda ölçün.

Çipe bağlanan ve yıkanan protein salgılayan hibridoma hücrelerini tanıtın.

Bağlı hücreler, yakındaki dizideki ligandlarla etkileşime giren proteinleri salgılar.

Bu etkileşimler, yansıyan ışığın açısını ve yoğunluğunu değiştirerek, sensör tepkisinde bir değişikliğe neden olarak hücrelerin salgı aktivitesini doğrular.

Lokalize yüzey plazmon rezonansını