JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:14 dk. • July 8th, 2025
Yerleşik bir Mycobacterium tuberculosis veya Mtb enfeksiyon modeli içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Kuyucuklar, enfekte olmamış makrofajlarla çevrili, yoğun şekilde paketlenmiş Mtb ve Mtb ile enfekte nekrotik makrofajlardan oluşan bir çekirdek içeren hücre agregatlarını içerir - in vivo enfeksiyonu taklit eder.
Antibiyotikler rifampisin ve moksifloksasin seri seyreltme alın.
Ortamı enfeksiyon plakasından atın, antibiyotik seyreltmelerini kuyucuklara aktarın ve inkübe edin.
Antibiyotikler hücre agregatları boyunca yayılır ve bakteri hücrelerine girer.
Rifampisin, bakteriyel RNA polimerazı bağlayarak RNA sentezini inhibe eder ve bakteri ölümüne neden olur.
Moksifloksasin, bakteri DNA topoizomerazını bağlayarak replikasyonu inhibe eder ve bakteri üremesini durdurur. Bağlanma ayrıca, bakterileri öldüren reaktif oksijen türlerinin birikimi de dahil olmak üzere stres tepkilerine neden olur.
Kuluçka sonrası, bir redoks göstergesi olan resazurin ekleyin. Canlı ve metabolik olarak aktif bakterilerin içinde, oksidoredüktaz enzimi mavi resazurini pembe floresan resorumine düşürür.
Canlı bakterileri tespit etmek için floresanı ölçün.
Bakteriyel sağkalım, artan antibiyotik konsantrasyonu ile a
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin