Viral Enfeksiyonun Antikora Bağlı Artışını İncelemek İçin Bir İn Vitro Test
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:35 dk. • July 8th, 2025
Zika virüsüne karşı antikorlar içeren bir serum örneğinin seri dilüsyonları olan bir mikroplaka alın.
Dang muhabiri virüs parçacıkları veya RVP'ler ekleyin ve inkübe edin.
Tasarlanmış RVP'ler, yapısal proteinler içeren bir zarf ve bir floresan proteini kodlayan genomik RNA içeren bir nükleokapsid içerir.
Dang humması ve Zika virüslerinin zarf proteinlerinin yapısal homolojisi, antikorların RVP'lerle çapraz reaksiyona girerek bir kompleks oluşturmasına neden olur.
RVP'ler tarafından enfeksiyona izin verilmeyen insan lösemi hücrelerini ekleyin.
Hücreler, RVP'ye bağlı antikorları tanıyan ve RVP'lerin endozomların içine girişini kolaylaştıran Fc reseptörlerine sahiptir - antikora bağlı güçlendirme veya ADE olarak adlandırılır.
Hücreleri pelet haline getirin ve içselleştirilmemiş RVP'ler içeren süpernatanı atın. Bir büyüme ortamı ekleyin ve inkübe edin.
RVP ve endozomal membranların pH'a bağlı füzyonu, genomik RNA'yı serbest bırakmak için parçalanan ve floresan protein ekspresyonunu sağlayan nükleokapsidi serbest bırakır.
Hücreleri düzeltin ve akış sitometrisi kullanarak analiz edin.
Uygun bir antikor konsantrasyonunda daha yüksek bir floresan, artmış RVP içselleştirmesini temsil eder v
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin