JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 6:23 dk. • July 8th, 2025
Tek katmanlı memeli hücreleri içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Kuyucukları, enfekte bir farenin farklı organlarından türetilen Zika virüsünü içeren doku homojenatlarının seri seyreltmeleri ile aşılayın.
Endositoz yoluyla hücrelere girdikten sonra, virüs çoğalır ve komşu hücreleri enfekte etmek için tomurcuklanır.
Virüs hareketini kısıtlayan fiziksel bir bariyer oluşturarak yüksek viskoziteli bir metilselüloz çözeltisi ile kaplayın.
Bariyer sadece hemen komşu hücrelerin enfeksiyonuna izin verir, enfekte olmuş hücrelerin odaklarını oluşturur ve her odağın tek bir virüs partikülünden kaynaklanmasını sağlayarak doğru miktar tayinini mümkün kılar.
Hücreleri sabitleyin ve zarı geçirgen hale getirin. Hücrelere giren ve viral antijen ile etkileşime giren birincil antikorları ekleyin.
Birincil antikora bağlanan peroksidaz konjuge bir ikincil antikor ekleyin.
Enfekte olmuş hücrelerin odaklarını gösteren renkli lekeler oluşturmak için peroksidaz tarafından dönüştürülen kromojenik bir substrat ekleyin.
Farenin farklı organlarındaki virüs titresini ölçmek için odakları sayın.
Homojenize edilmiş numuneleri eksi 80 santigrat derece dondurucudan çıkarın ve çözülmelerine izin verin. Numuneler buz
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin