Bakteriyosin Üreten Murin Fekal Bakteri İzolatlarının Antimikrobiyal Potansiyelinin Değerlendirilmesi

Antimikrobiyal bir peptit olan bakteriyosin üreten laktik asit bakterileri veya LAB içeren fare dışkı süspansiyonunu alın ve önceden ısıtılmış bir LAB seçici yumuşak agar ortamına aşılayın.

Ortamı bir agar plakasına dökün ve ilk katmanı oluşturun.

İkinci bir agar tabakasını kaplayın ve inkübe edin.

İlk katman, salgılanan bakteriyosin moleküllerinin kolonilerden çevredeki ortama yayılmasına izin vererek seçici olarak LAB büyümesini destekler.

İkinci katman, bakteriyosinin difüzyonuna izin veren ve yüzeydeki LAB kolonilerinin büyümesini önleyen hücresiz bir ortam içerir.

Şimdi, bakteriyosine duyarlı bir suş içeren üçüncü bir agar tabakası dökün.

Üçüncü tabakada üreyen bakteriler alt tabakalardan yayılan bakteriyosin ile karşılaşırlar.

Bakteriyosin, hassas bakterilerin hücre zarını bozar, hücresel homeostazı bozar ve hücre ölümüne neden olur, üçüncü katmanda açık bir bölge olarak görülebilir.

Bakteriyosin gücünü değerlendirmek için bölge çapını ölçün.

Dışkı örneklerinde bakteriyosin üreten bakteri hücrelerini saymak için, bakteriyosin üreticisinin seyreltilmiş hücrelerini 4 mililitre önceden ısıtılmış MRS yumuşak agar'a aktarın. Agarı girdaplama ile karıştırın ve hücreleri bir MRS %1.