JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:29 dk. • July 8th, 2025
Kemik iliği türevi makrofajlar veya BMM'ler içeren lameller içeren iki mikroplaka alın.
Leishmania metasiklik promastigotları - uzun kamçılı aşama - bir plakaya ve amastigotları - oval kamçısız aşama - başka bir plakaya ekleyin.
Kuluçka sırasında, parazitler makrofaj reseptörlerine bağlanarak reseptör aracılı fagositozu tetikler.
Fagozom, endoplazmik retikulum ve Golgi aygıtından türetilen lizozomlar ve veziküllerle birleşerek parazitohorlu bir vakuole olgunlaşır.
Vakuolün azalmış pH'ı, promastigotun amastigota farklılaşmasını ve replikasyonunu tetikler.
İçselleştirilmemiş parazitleri gidermek için yıkayın.
Enfekte makrofajları düzeltin ve hücrelere ve parazitlere nüfuz etmek için deterjan ekleyin.
Makrofaj ve parazit çekirdeklerini lekelemek için bir floresan nükleik asit boyası ekleyin.
Lamelleri slaytlara monte edin ve daha büyük konak çekirdeklerini ve çevreleyen daha küçük amastigot çekirdeklerini ölçerek bir floresan mikroskobu altında gözlemleyin.
Başlangıçta farklılaşmamış promastigotlarla enfekte olmuş makrofajlar ve replikatif amastigotlarla enfekte olmuş makrofajlar içindeki çoğalmalarını değerlendirmek için amastigot sayılarını karşılaştırın.
Hücreleri L. Amazonensis il
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin