Kuduz Virüsü Antijenlerinin Saptanmasına Yönelik Bir İmmünohistokimya Boyaması

Formalinle sabitlenmiş, parafine gömülü kuduz virüsü ile enfekte olmuş fare beyin dokusu bölümünü taşıyan bir slaytla başlayın. Sabit bölüm, protein çapraz bağlanması yoluyla viral antijenleri tutar.

Parafini çıkarmak için slayta bir ksilen çözeltisi uygulayın.

Dokuyu yeniden sulandırmak ve sulu çözeltilerle uyumlu hale getirmek için slaytı azalan etanol konsantrasyonlarına daldırın.

Protein çapraz bağlarını bozmak ve antijen erişilebilirliğini artırmak için proteaz içeren bir tampon ekleyin.

Endojen peroksidazları bloke etmek için hidrojen peroksite batırın ve spesifik olmayan etkileşimleri önlemek için bir bloke edici solüsyon uygulayın.

Antijen-antikor kompleksleri oluşturan kuduz antijenine özgü primer antikorları tanıtın.

Birincil antikorlara bağlanan biyotinile ikincil antikorlar ekleyin. Biotin ile etkileşime giren streptavidin konjuge peroksidaz enzimleri ile inkübe edin.

Eflatun kırmızı bir çökelti üreten bir peroksidaz substratı ekleyin.

Dokuyu nükleer bir leke ile boyayın, ardından bir mavileştirme maddesi uygulayın ve çekirdekleri maviye boyayın.

İmmünohistokimya görüntüsü, sitoplazmada macenta-kırmızı lekeleri ortaya çıkararak doku bölümünde kuduz antijenlerinin varlığ