JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:00 dk. • July 8th, 2025
Lenfositler ve makrofajlar dahil olmak üzere insızmış bağışıklık hücreleri ile formalinle sabitlenmiş, deparafinize edilmiş ve rehidre edilmiş temporal arter biyopsi bölümleri içeren bir slaytla başlayın.
Aktive edilmiş makrofajlar, makrofajları diğer bağışıklık hücrelerinden ayıran, hastalıkla ilgili bir belirteç olan folat reseptörü beta veya FR-β eksprese eder.
Yüzey reseptörlerini almak için slaytı önceden ısıtılmış bir tampona aktarın.
Kesiti, hücre içi peroksidaz aktivitesini bloke eden hidrojen peroksit ile tedavi edin.
Bu proteinleri eksprese eden bağışıklık hücrelerine bağlanan CD3, CD68 ve FR-β'yi hedefleyen birincil antikorların bir karışımını tanıtın.
Birincil antikorlarla etkileşime giren biyotinile edilmiş ikincil antikorları ekleyin ve yıkayın.
Biotin ile bağlanan streptavidin konjuge enzimleri ile kaplayın.
Enzimlerle etkileşime giren ve lokalize kahverengi çökeltiler üreten kromojenik bir substrat ile muamele edin.
Bir karşı leke ekleyin - hematoksilen, çekirdekleri maviye boyayın.
Mikroskobik olarak küçük, yuvarlak, kahverengi lekeli hücreleri CD3 eksprese eden lenfositler ve büyük, düzensiz, kahverengi lekeli hücreleri CD68 ve FR-β eksprese eden makrofajlar olara
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin