JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:49 dk. • July 8th, 2025
Sentetik antijen sunan hücreler olarak işlev gören, antijenik peptit-MHC kompleksleri, yapışma ve ko-uyarıcı moleküller ile konjuge edilmiş lipid çift katmanları ile kaplanmış silika boncuklar olan boncuk destekli lipid çift katmanlarını veya BSLB'leri alın.
T hücreleri ile inkübe edin.
TCR'ler, yardımcı uyarıcı sinyallerle birlikte bir bağışıklık sinapsı oluşturan ve T hücrelerini aktive eden BSLB'ler üzerindeki antijenik peptitlere bağlanır.
Bu bağlanma, hücre içi sinyal kaskadlarını tetikleyerek aktinin yeniden düzenlenmesini indükler ve sinapsta yapışma ve sinyal molekülleri içeren mikro kümeler oluşturur.
T hücreleri, TCR'ler, ko-uyarıcı moleküller ve litik granül içerikleri açısından zenginleştirilmiş trans-sinaptik vezikülleri sinapsa salarak BSLB'lere bağlanır.
BSLB'leri T hücrelerinden ayırmak için ko-kültürü yavaş yavaş soğutun.
Süpernatanı santrifüjleyin ve atın. Yüzeylerdeki serbest bağlanma bölgelerini bloke etmek için protein içeren bir tampon kullanın.
BSLB'leri ve T hücrelerini, spesifik sinyalleme ve ko-stimülatör moleküllere bağlanan florofor konjuge antikorlarla santrifüjleyin ve tedavi edin.
Akış sitometrisini kullanarak, sinaptik çıktıyı ölçmek için BSLB'lerden
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin