Önceden İşlem Görmüş İnsan Trombositlerinin Kollajen Kaynaklı Agregasyonunu İzlemek için Bir Türbidimetrik Analiz
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:42 dk. • July 8th, 2025
Aktive edilmemiş trombositler ve fibrinojenler (bir plazma glikoproteini) içeren ön işlem görmüş, insan trombosit süspansiyonu içeren cam küvetlerle başlayın.
Küvetler, homojen karıştırma için bir karıştırma cihazı içerir.
Kontrol küvetini, bulanıklığı değerlendirerek toplamayı ölçen bir toplayıcıya yerleştirin.
Trombosit agregasyonu için bir agonist olan, trombositin yüzey reseptörleri ile etkileşime giren ve aşağı akış sinyal kaskadlarını aktive eden kollajeni tanıtın.
Bu, bir trombosit yüzey kanalı olan Pannexin 1 kanalı yoluyla ATP salınımı ile sonuçlanır, trombosit aktivasyonunu ve şekil değişikliğini başlatır ve agregasyon eğrisinde bir depresyona yol açar.
Fibrinojen ayrıca aktive edilmiş trombositleri çapraz bağlar, kollajen kaynaklı trombosit agregasyonunu teşvik eder, bulanıklığı değiştirir ve agregasyon eğrisinde kademeli bir artışa neden olur.
Test küvetine, bu kanalı tıkayan Pannexin 1 kanalının yüksek konsantrasyonda bir inhibitörü ile muamele edin.
Küvete kollajen ekleyin. İnhibitör etkileşimleri, ATP salınımını önler ve değişmemiş bulanıklık ve düz bir agregasyon eğrisinden belirgin olan kollajen kaynaklı trombosit agregasyonunu engeller.
Trombositten zengin plazma
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin