Test Bileşiklerinin Konakçı Hücrelerde Viral Giriş ve Füzyon Üzerindeki Etkisini Değerlendirmek İçin Bir Test

Karaciğer kanseri hücrelerini alın ve endositozu bozmak için düşük bir sıcaklıkta inkübe edin.

Salgılanan bir lusiferaz raportörünü kodlayan tasarlanmış bir RNA genomu içeren rekombinant bir Hepatit C virüsü veya HCV'yi tanıtın.

Viral lipoproteinler, konakçı hücreler üzerindeki proteoglikanlar ile etkileşime girerken, viral zarf glikoproteinleri spesifik konak reseptörlerine bağlanır.

Seçilen kuyucuklarda, viral glikoproteinlere bağlanan test bileşiğini ekleyin.

Fizyolojik sıcaklıkta inkübasyon üzerine, bağlı virüsler endositoz edilir.

İçselleştirilmemiş virüsleri atın, bir büyüme ortamı ekleyin ve kuluçkaya yatırın.

İşlenmemiş kuyucuklarda, glikoproteinler viral zarf-endozom füzyonuna yardımcı olarak nükleokapsidi serbest bırakırken, bileşik maskeleme tedavi edilen kuyucuklarda füzyonu bozar.

Serbest bırakıldıktan sonra, RNA, hücre dışı olarak salgılanan lusiferaz da dahil olmak üzere viral proteinleri eksprese eder.

Lusiferaz içeren süpernatanı hasat edin ve ışık yaymak için lusiferaz ile oksitlenen bir biyolüminesan substrat ekleyin.

Tedavi edilen kuyucuklarda tedavi edilmeyenlere kıyasla azalmış bir lüminesans, viral zarf-endozom füzyonunun inhibisyonunu gösterir.

Viral füzyonu