Antibiyotik Tedavisi Altında Bakteriyel Sağkalımı Belirlemek İçin Bir ATP Kullanım Testi

Bir bakteri kültürünü bir tahlil plakasına tohumlayarak başlayın. Ardından plakayı inkübe edin.

Bakteri hücreleri, birbirlerine yapışmalarını ve küçük agregalar oluşturmalarını sağlayan yüzey adezinlerine ve piliye sahiptir.

Kuyucuklara değişen antibiyotik konsantrasyonları ekleyin ve birini kontrol için tedavi edilmeden bırakın.

Antibiyotik molekülleri hassas bakterilerle etkileşime girerek büyüme ve çoğalma yeteneklerini etkileyerek ölümlerine yol açar.

Antibiyotiğe dirençli bakteriler metabolik olarak aktif kalır ve ATP molekülleri üretir.

Bakteri hücrelerini bozmak, ATP de dahil olmak üzere hücre içi içeriklerini serbest bırakmak için bir sonikatör kullanın.

Lusiferin, lusiferaz enzimi ve diğer kofaktörleri içeren ATP kullanımı kızdırma reaktifi ekleyin.

Lusiferaz, lusiferini uyarılmış bir oksilusiferine dönüştürmek için ATP ve oksijeni kullanır.

Oksilusiferin daha sonra ışıldayan ışık yayarak temel durumuna geçer.

Bir plaka okuyucu kullanarak absorbansı ölçün.

Daha yüksek antibiyotik konsantrasyonlarında absorbanstaki azalma, daha düşük ATP üretimini gösterir ve bu da bakteri sağkalım oranının azaldığını gösterir.

Asılı bakterilerin konsantrasyonunu belirlemek için optik yoğun