Sitotoksik T Lenfosit Yanıtlarında İmmün Baskınlığı Değerlendirmek İçin Bir Test
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:00 dk. • July 8th, 2025
Değişen immünojenisiteye sahip reaktif olmayan bir peptit epitopu veya tümör antijeninden türetilmiş peptit epitopları sunan floresan boya etiketli hedef hücrelerle başlayın.
Bu hücreler, sırasıyla reaktif olmayan, subdominant ve immünodominant peptit epitoplarının sunumuna karşılık gelen düşük, orta ve yüksek olmak üzere değişen floresan yoğunlukları sergiler.
Hücre süspansiyonunu intravenöz olarak hassaslaştırılmış bir fareye uygulayın.
Enjekte edilen hücreler, sitotoksik T lenfositleri veya CTL'ler dahil olmak üzere bağışıklık hücresi popülasyonlarını içeren dalağa gider.
Dalak içinde, CTL'ler hedef hücrelerin epitopları ile etkileşime girer.
Daha immünojenik olan immünodominant epitoplar, sitotoksik maddeleri serbest bırakarak ve yüksek yoğunluklu floresan hücre lizisi ile sonuçlanan sağlam bir CTL bağışıklık tepkisini tetikler.
Fare dalağını toplayın ve mekanik olarak bozun. Kırmızı kan hücrelerini ortadan kaldırmak ve süspansiyonu filtrelemek için bir lizis tamponu ekleyin.
Hücre peletini santrifüjleyin ve yeniden süspanse edin.
Floresanla etkinleştirilen bir hücre sıralayıcı kullanarak hücreleri sıralayın. Orta ve düşük yoğunluklu floresan hücrelere kıyasla yüksek yoğunluklu
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin