JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 4:37 dk. • July 8th, 2025
Nöronal kültürleri artan konsantrasyonlarda bir test toksini ile tedavi edin.
Toksin hücrelere girer ve sitozole salınır.
Potansiyeline bağlı olarak, toksin veziküler füzyonu önleyebilir ve nörotransmitter salınımını inhibe edebilir.
Ortamı, nöronal aksiyon potansiyellerini bloke etmek için spesifik nörofarmakolojik bileşikler içeren bir tamponla değiştirin.
Kültür kabını bir elektrofizyoloji aşamasına yerleştirin. Kayda başlamak için, bir kayıt elektrodu içeren bir pipetle bir nöron soma bağlayın.
Küçük bir membran kısmını aspire etmek için sabit negatif basınç uygulayın ve kayıt sırasında minimum parazit sağlayan sıkı bir sızdırmazlık olan bir gigaseal oluşturun.
Nöronal akımları ölçmek için sabit bir membran voltajını koruyun.
Nöron ve pipet arasında doğrudan temas kurarak zarı yırtmak için negatif basınçlı darbeler uygulayın.
mEPSC adı verilen nörotransmiterlerin alımı nedeniyle nöronda üretilen akımları kaydedin.
Artan toksin maruziyeti ile mEPSC frekansındaki bir azalma, nörotransmitter salınımının inhibisyonunu gösterir.
Botulinum nörotoksin serotip A'yı ESN kültür ortamında istenen nihai konsantrasyonun 100 katına kadar seyreltin ve 37 santigrat dereceye kadar ısıtın. Ardın
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin