Konveksiyonla Geliştirilmiş Antikorların Fare Beynine İletilmesi

Kraniyal orta hat insizyonu olan anestezi uygulanmış bir fareyi stereotaktik bir çerçeveye sabitleyin.

Kafatasında bir referans noktası olan bregmayı tespit edin ve enjeksiyon yerini belirleyin.

Beyni kaplayan dura mater'e zarar vermekten kaçınarak bölgede bir çapak deliği oluşturun.

Antikorlarla yüklü, stereotaktik bir robota monte edilmiş ve bir infüzyon pompasına bağlı bir adım kateteri alın.

Kateter, metal bir iğneden çıkıntı yapan ve füzyon noktasında kademeli bir dış çap oluşturan kaynaşmış bir silika kılcal damar içerir.

Kateteri beyin parankimine yerleştirin. Kateter açıklığında bir basınç gradyanı oluşturmak için infüzyon pompasını başlatın ve antikorları konveksiyonla güçlendirilmiş dağıtım olarak bilinen bir teknik olan kontrollü bir oranda verin.

Kademeli çap dokuyu sıkıştırarak bir sızdırmazlık oluşturur.

Conta, sıvı geri akışını önler ve doku hasarı riskini azaltırken büyük antikor hacimlerinin dağıtılmasını sağlar.

Murin striatumuna antikor enjeksiyonu için, anestezi uygulanmış bir farede cilt tutamına yanıt verilmediğini doğrulayın ve kafayı bir saç düzeltici ile tıraş edin. Cildi iyot çözeltisine batırılmış pamuklu çubuklarla dezenfekte edin.

Kraniyal orta hat boyunca 10 milimetrelik bir cilt kesisi yapmak için bir neşter kullanın ve göz hizasında bitirin. Kafatası yüzeyinin yatay ve sıkıca sabitlenmiş olmasına dikkat ederek burun kelepçesi ve kulak çubuklarını kullanarak fareyi stereotaktik çerçeveye sabitleyin.

Şırıngayı stereotaktik robota yerleştirin ve matkap ucunu kateterin ucu ile bir referans noktasında senkronize edin. Cildi geri çekmek için forseps kullanın ve kafatası yüzeyindeki bregmayı lokalize edin. Matkap ucunun ucunu kullanarak yazılımda bregma'yı referans alın ve matkabı bregma konumundan 1 milimetre önden ve 2 milimetre yanal konuma getirin.

Dura materyaline zarar vermemeye dikkat ederek bir çapak deliği açın ve şırıngayı çapak deliğinin üzerinde hareket ettirin. Kateterde hava kabarcığı kalmadığından emin olmak için şırıngadan 0,5 ila 1 mikrolitre dağıtın. Konveksiyonla güçlendirilmiş teslimatı gösterildiği gibi başlatın, enjeksiyon noktasından herhangi bir sıvı geri akışı izi için kafatası yüzeyini gözlemleyin.

Doğumun ve kateterin çıkarılmasının sonunda, enjeksiyon sırasında kateter tıkanması belirtisi olup olmadığını kontrol etmek için enjeksiyon pompasını dakikada 0,2 mikrolitre ile başlatın. Herhangi bir tıkanma meydana gelmezse, kateter ucundan hemen bir damla enjeksiyon karışımı geldiği gözlenmelidir.