JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:52 dk. • July 8th, 2025
Sıçan embriyosu hipokampisini ele alalım.
Tripsin ekleyin. Hipokampal hücreleri gevşeterek doku matrisinin bozulmasına aracılık etmek için kuluçkaya yatırın.
Bir tampon ile seyreltin. Tripsin ile sürekli enzimatik sindirim için kuluçkaya yatırın.
Daha sonra, doku kütlesini ortam içeren bir tüpe aktarın. Tek hücrelere mekanik ayrışma için tekrar tekrar pipetleyin.
Kültür plakaları içindeki poli-L-lizin kaplı lameller üzerindeki tohum hücreleri.
Kuluçkaya yatmak. Hipokampal hücreler kaplanmış yüzeylere yapışır. Nöronlar bir lamel geliştirir ve küçük nöritleri uzatır.
Ayrıca, nöritler aksonal ve dendritik süreçlerle büyür ve bir nöronal ağ oluşturur.
Olgun nöronlar sinaptik uyarıcı reseptörleri, N-Metil-D-aspartat reseptörlerini veya NMDAR'ları eksprese eder.
İnkübasyon sonrası, lamelleri medya ile yıkayın.
Seyreltilmiş bir otoimmün ensefalit hasta serumu ekleyin. Otoantikorlar nöronal NMDAR'lara bağlanır.
Tampon ile yıkayın ve ardından hücreleri sabitleyin.
NMDAR'a bağlı otoantikorlara bağlanan florofor işaretli ikincil antikorlar ekleyin.
Tampon ile yıkayınız. Çekirdekleri lekelemek için lamel DAPI içeren montaj ortamının üzerine yerleştirin.
Nöronlar üzerindeki floresan sinyallerin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin