JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 5:01 dk. • July 8th, 2025
Solunum sinsityal virüsü veya RSV'ye özgü nötralize edici antikorlar içeren seri olarak seyreltilmiş, ısıyla etkisiz hale getirilmiş insan serumu alın.
Viral süspansiyonu ekleyin. Antikorlar, virüsleri seyreltmeye bağlı bir şekilde nötralize eder.
Karışımı insan epitel hücresi tek katmanlarına verin ve viral adsorpsiyon için inkübe edin.
Karışımı atın. Yarı katı bir kaplama oluşturan karboksimetilselüloz içeren ortamı ekleyin. Kuluçkaya yatmak.
RSV, viral RNA ve proteinleri sentezlemek için konakçı hücre makinesini kullanır ve bunlar daha sonra ayrı viryonlar olarak bir araya gelir ve tomurcuklanır.
Enfekte hücreler sonunda ölür. Karboksimetilselüloz virüs hareketini kısıtlayarak lokalize enfeksiyona ve hücre ölümüne neden olarak plaklar oluşturur.
Kaplamayı çıkarın.
Hücreleri aseton içeren bir tamponla sabitleyin. Hücrelere nüfuz etmek ve spesifik olmayan antikor etkileşimlerini önlemek için deterjan içeren bir bloke edici tampon ekleyin.
Viral proteinleri hedef alan birincil antikorlar ekleyin.
Primer antikorları hedef alan florofor konjuge sekonjene sekonder antikorlarla kaplama.
Floresan plakların miktarını belirlemek için kuyuları görüntüleyin.
RSV'nin yüzde ellisini nötralize
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin