Elektrokemilüminesans Testi Kullanılarak İnsan Adacığı Otoantikorlarının Tespiti

Tip 1 diyabetin bir biyobelirteci olan adacık otoantikorlarını tespit etmek için insan serum örneklerini alın ve enterferans yapan bileşenleri inhibe etmek için asetik asit ekleyin.

İnkübe edin ve ardından asidi nötralize etmek için bir alkali tampon ekleyin.

Tedavi edilen serumu, her biri test için optimal bir konsantrasyonda olan biyotinile yakalama ve rutenyum konjuge antijenleri dahil olmak üzere insan adacık otoantijenlerinin bir karışımını içeren çok kuyulu bir plakaya aktarın.

Pozitif numunedeki adacık otoantikoru, rutenyum konjuge antijeni biyotinile yakalama antijenine köprü kurarak bir antijen-antikor kompleksi oluşturur.

Karışımı, bir bloke edici madde ile önceden işlenmiş ve çalışma ve karşı elektrotlarla donatılmış, streptavidin kaplı bir elektrokemilüminesans plakasına aktarın.

Bağlı streptavidin ile biyotinile kompleks etkileşimlere izin vermek için inkübe edin ve ardından yıkayın.

Tripropilamin veya TPA içeren bir tampon ekleyin.

Bir elektrokemilüminesans cihazında, elektrotlar arasındaki voltaj uygulaması, rutenyum ve TPA'nın oksidasyonunu başlatarak TPA radikalleri üretir.

TPA radikalleri, temel durumlarına geri dönerken fotonlar yayan rutenyum komplekslerini uyar