JoVE Encyclopedia of Experiments
İmmünoloji
0 görüntüleme • 2:39 dk • July 8th, 2025
Prostat kanseri hücrelerini alın ve bunları anestezi uygulanmış, bağışıklığı baskılanmış çıplak bir fareye deri altından enjekte edin.
Bir bağışıklık tepkisinin olmaması, enjekte edilen hücrelerin hayatta kalmasına ve çoğalmasına izin vererek bir tümör oluşturur.
Tümör hücreleri, bir hücre yüzeyi proteini olan prostat spesifik bir membran antijenini veya PSMA'yı aşırı eksprese eder.
Bir radyoizleyiciye konjuge PSMA'ya özgü antikorları alın ve bunları tümör taşıyan farenin kuyruğuna intravenöz olarak enjekte edin.
Antikorlar tümör hücrelerine ulaşır ve PSMA'ya bağlanarak tümörü etiketler.
Anestezi uygulanmış fareyi pozitron emisyon tomografisine veya PET tarayıcıya yerleştirin ve bir tarama elde edin.
Üretilen görüntü, tümör konumuna karşılık gelen yüksek antikor alım alanlarını vurgulayarak radyoizleyicinin dağılımını gösterir.
Erkek atimik çıplak farelerde, deri altına 5 x 106 LNCaP prostat kanseri hücresi implante edin ve bunların 100 ila 150 milimetre küp ksenogrefte büyümesine izin verin. Aşılamadan üç ila dört hafta sonra, tümörler hazır olmalıdır.
Görüntüleme için, 89Zr-DFO-J591 radyo immünokonjugatını% 0.9 steril salin içinde mililitre başına 1 miliküri konsantrasyonuna seyreltin. Daha sonra, 89Zr-DFO-J591 çözeltisinin 200 mikrolitresini, ksenogreft taşıyan farelerin lateral kuyruk damarına enjekte edin.
İstenen görüntüleme zaman noktasında, fareyi %2 izofluran:oksijen gazı karışımı ile uyuşturun. Fareyi küçük bir hayvan PET tarayıcı yatağına yerleştirin. Ayak parmağını kıstırma yöntemini kullanarak anesteziyi doğrulayın ve anestezi sırasında kurumayı önlemek için farenin gözlerine veteriner merhemi sürün.
% 1 izofluran: oksijen gazı karışımı kullanarak tarama sırasında anesteziyi koruyun. Bunu takiben, 350 ila 700 kiloelektron voltluk bir enerji penceresi ve altı nanosaniyelik bir tesadüf zamanlama penceresi kullanarak en az 40 milyon çakışan olayla statik tarama yoluyla fare için PET verilerini elde edin.